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Nano-500与某知名进口品牌的DNA检测性能比较

Nano-500-2.jpg

1.Nano系列微量分光光度计


超微量分光光度计是一类能够迅速定量且无损DNA样品的仪器。同时因该方法无需额外的试剂和标准品,操作步骤简单方便,因而备受各类生物实验室的喜爱。其主要利用了DNA在近紫外光区波长260nm处有最大的吸收峰,从而可以定量样品中DNA的浓度。

用经典的基于比色皿的分光光度计进行DNA浓度检测时,一般需要较大的样本体积,同时检测范围也相对有限。而Nano系列微量分光光度计仅需2ul的微量样本便可实现方便快捷的检测方式。



图1 Nano-500的样品检测


2。优化的检测方式


Nano系列微量分光光度计是利用表面张力将小量样品保持在两个基座之间,无需事先稀释便可对高浓度样品进行检测,它使用的2048像素线阵CCD传感器可更加准确的获得光谱数据,内置的分析软件能够将结果自动转换为1cm光径下相对应的读值并以报告格式输出。我们采用的独特的光纤设计能有效减少光散射现象,同时样品与仪器的完全封闭式检测方式也能成功避免空气中杂质对光强的分散,从而使检测样品结果更为精确(图2)。

2. Nano-500测量样品的光路图


3.DNA样本的检测


我们将约为12000ng/ul的高浓度鲑鱼精dsDNA(纯度98%)用TE缓冲液梯度稀释10次,每次稀释1倍,将稀释好的样品分别在Nano-500与某品牌上进行检测。由图3可以看出Nano-500与某品牌的检测结果均是线性的,R2均为0.999,即相同条件下,Nano-500和某品牌检测核酸浓度的准确性是一致的,在跨度3个数量级的浓度范围内,二者的输出也均保持稳定。

进口品牌.jpg500.jpg

图3。  某知名进口品牌与Nano-500的DNA浓度检测


将每个样品重复测试5次,分别计算Nano-500和某品牌的CV值,由表1可以看出二者在稳定性方面均表现优秀,CV值大部分均小于1% 。在低浓度样品的检测中Nano-500和某品牌的稳定性均略有降低,CV均超出2% 。


表1 某知名进口品牌与Nano-500的稳定性检测

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4.Nano-500的优势


Nano-500是Nano系列2019年新产品,专利设计的自动升降检测臂结构有效的避免因样品断裂而造成测量不准的情况,新增的自动空白与自动检测的功能也会极大的缩短测量的时间。附加的荧光检测功能仅需搭配高灵敏的荧光分析试剂盒,便可精确定量DNA浓度,最低检测下限可达到0。5pg/ul。


5.如何获得更优的检测结果


1。加样量理论值0.5-2.0ul,建议2.0ul;

2.检测前后清洗基座3次;

3.空白校对:目标分析物的相同缓冲液;

4.通常情况无需检测空白溶液,若检测,溶液浓度需0-1。0ng/ul,且波长范围内的所有OD值均应在±0。04内,超过该标准建议重新做空白校对。


6.总结


现在使用Nano系列微量分光光度计精确、重复的检测DNA(或RNA)的数值变得更加容易,其定量检测结果的下限可与传统的UV-Vis分光光度计相媲美,内置软件不但会自动算出其浓度,还可以给出相应的纯度(A260/280、A260/230)判断,这将为后续的实验节省更多的时间。


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此文关键词:微量分光光度计
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