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恒温扩增PCR Master Mix

产品分类: 恒温扩增PCR试剂
    Allsheng恒温扩增PCR Master Mix 是一种即用型的恒温扩增试剂盒,本试剂盒包含建立恒温反应体系(除引物和模板之外)的所有组分。
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        Allsheng恒温扩增PCR Master Mix是一种即用型的恒温扩增试剂盒,本试剂盒包含建立恒温反应体系(除引物和模板之外)的所有组分。与目前广泛应用的real-time qPCR技术相比,其需要四到六条模板特异性的引物以及具有链置换活性的Bst酶,在恒温条件下1h内完成扩增;无需昂贵的荧光定量PCR仪;恒温检测方法具有特异性好,灵敏度高及检测范围广泛等优势,可与real-time qPCR检测技术相媲美。


      交叉引物扩增技术(CPA)介绍

      恒温扩增技术是继PCR技术后发展起来的一门新型的核酸扩增技术(Nucleic Acid Isothermal Amplification, NAIA),其扩增反应的全过程均在同一温度下进行。

      与传统PCR技术相比,使得他们对扩增所需仪器的要求大大简化,反应时间大大缩短,因而具有巨大的应用价值,成为分子诊断行业发展的热点。

      CPA扩增主要包含以下几个步骤:

      1. 交叉正向引物CPF中的PFs与模板DNA中PFa互补,启动DNA合成,使得PRa被引入到所扩增的产物中;

      2. 外围引物DP1s与PFa前端DP1a序列互补,通过链置换型DNA聚合酶向前延伸,一边置换CPF合成的能与CPR和DP2a结合的单链产物(结构3),一边与模板DNA形成双链产物(结构2);

      3. 在结构3中,DP2a通过链置换型DNA聚合酶向前延伸,置换出由CPR所延伸的单链产物(结构5),同时合成与步骤2中由CPF延伸所产生单链DNA形成双链产物(结构4),而结构5相对起始的DNA模板,多了PRs和PFs两个片段序列;

      4。 单链结构5中的3’端的PFa和PRs可分别与CPF中的PFs和CPR中的PRa互补结合, 可在链置换型DNA聚合酶的作用下延伸和置换出相应的单链产物。延伸产物相对结构5来说又增加了一个PFs区域(结构8);

      5. 因此,扩增引物CPF和CPR的不断杂交和延伸,不仅使得结构5的长度不断的加长,从而引入更多CPF和CPR 3’端互补区域,同时也置换出了各种可与CPF和CPR 3’端互补的单链产物;

      6. 通过CPF和CPR的不断杂交延伸和DNA聚合酶的链置换作用,使得DNA拷贝数不断的增加,从而达到基因扩增的效果。


      应用

      这种新型的核酸恒温扩增方法,其广泛应用于细菌,病原微生物,寄生虫以及病毒等的快速检测。


      特点

      恒温检测方法由于其特异性好,灵敏度高,反应设备及检测设备价格低廉等广受科研工作者的亲睐,是未来检测技术发展的趋势。


      性能对比


      使用Allsheng® 恒温 PCR Master Mix(红色)、S公司(绿色)以及D公司(蓝色)提供的恒温PCR Master Mix对对虾白斑病毒(WSSV)进行实时定量PCR测定(左),模板使用0。1ng/μl对虾白斑病毒基因组DNA。相同条件下,Allsheng®具有更好的扩增能力且重复性良好。


      使用说明

      请详见说明书


      订货信息

      订货号 产品描述
      RS-IA0101-24TAllsheng® 恒温扩增PCR Master Mix 24次
      RS-IA0101-48TAllsheng® 恒温扩增PCR Master Mix 48次
      RS-IA0101-96TAllsheng® 恒温扩增PCR Master Mix 96次

      RS-FD0101-24TAllsheng® 恒温扩增PCR Master Mix(冻干粉)24次
      RS-FD0101-48TAllsheng® 恒温扩增PCR Master Mix(冻干粉)48次
      RS-FD0101-96TAllsheng® 恒温扩增PCR Master Mix(冻干粉)96次




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